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Invitrogen反轉錄酶III主要特點

發布時間: 2017-05-24  點擊次數: 3749次
Invitrogen反轉錄酶III是以RNA為模板指導三磷酸脫氧核苷酸合成互補DNA(cDNA)的酶。哺乳類C型病毒的反轉錄酶和鼠類B型病毒的反轉錄酶都是一條多肽鏈。鳥類RNA病毒的反轉錄酶則由兩上亞基結構。真核生物中也都分離出具有不同結構的反轉錄酶。

Invitrogen反轉錄酶III缺乏連續性,因此要獲得像AMV反轉錄酶反應中產生同樣量的cDNA就要求使用較多單位的Invitrogen反轉錄酶III。用1微克的mRNA起始合成*條鏈的cDNA,要用8單位的M-MLV反轉錄酶才相當于1單位的Invitrogen反轉錄酶III的作用。
 
Invitrogen反轉錄酶III主要特點
Invitrogen反轉錄酶III都具有多種酶活性,主要包括以下幾種活性。
①DNA聚合酶活性;以RNA為模板,催化dNTP聚合成DNA的過程。此酶需要RNA為引物,多為色氨酸的tRNA,在引物tRNA3′-末端以5′→3′方向合成DNA。Invitrogen反轉錄酶III中不具有3′→5′外切酶活性,因此沒有校正功能,所以由反轉錄酶催化合成的DNA出錯率比較高。
②RNase H活性;由Invitrogen反轉錄酶III催化合成的cDNA與模板RNA形成的雜交分子,將由RNase H從RNA5′端水解掉RNA分子。
③DNA指導的DNA聚合酶活性;以反轉錄合成的*條DNA單鏈為模板,以dNTP為底物,再合成第二條DNA分子。
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